一种适用于PCR的棉花DNA快速批量提取的方法

摘要

本发明公开了一种适用于PCR的棉花DNA快速批量提取的方法，该方法是取棉花幼苗的下胚轴顶端装入PCR板的孔中，加入NaOH溶液，沸水浴对样品进行细胞破碎，取出后再加Tris-Hcl溶液，然后沸水浴，取出冷却后，用ddH2O稀释10～30倍，即得棉花DNA PCR反应的模板。通过SSR分子标记的检测，其带型图与使用传统的CTAB法提取出的DNA的带型图高度一致。本方法简单快捷，避免了CTAB法和SDS法的繁琐程序，省时省力。适用于批量棉花杂交种的DNA指纹纯度检测，以及棉花育种改良等需大批量提取DNA进行检测的项目。

主权项

一种适用于PCR的棉花DNA快速批量提取的方法，其特征在于按下列步骤进行：1）取0.45‑0.55cm处于幼苗期健康棉花的下胚轴顶端，分别置于96孔型PCR板的各孔中，并在每孔中加入40μL0.25mol/L的NaOH溶液；2）将每孔中加入步骤1）下胚轴顶端和NaOH溶液的PCR板，置于水浴锅沸水中煮1‑1.5min;3）取出步骤2）水煮后的PCR板，每孔再加入60μL0.17mol/L的Tris‑Hcl溶液，再置于水浴锅沸水中煮2.5‑3.5min;4）取出步骤3）水煮后的PCR板，冷却后将每孔DNA溶液用ddH2O稀释10～30倍，即得棉花DNA PCR反应的模板。