利用解脂耶氏酵母改进突变株生产二羧酸

摘要

本发明涉及一种生产具有长烃链的二羧酸(DCA)，也称为二酸的方法，其包括在基本上由包括至少一种碳源和一种氮源的高能底物组成的培养基中，培养通过定点诱变，以及更特定地，至少被破坏了编码乙酰基-CoA氧化酶的POX2、POX3、POX4和POX5基因而获得的解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)的突变菌株，并且使所述菌株经受选自有至少10个碳原子的n-烷烃，有至少10个碳原子的脂肪酸，其烷基酯类和天然油类的生物转化底物。

主权项

1.一种生产二羧酸的方法，包括:(a)生长阶段，其中将至少被破坏了编码乙酰基－CoA氧化酶的POX2、POX3、POX4和POX5基因的解脂耶氏酵母（Yarrowia lipolytica）突变体菌株在基本上由包括至少一种碳源和一种氮源的能量底物组成的培养基中培养，(b)生物转化阶段，其中在能量底物存在下，使所述的菌株与由油酸向日葵油组成的生物转化底物作用，以及(c) 回收所形成的二羧酸的阶段，其中所述解脂耶氏酵母突变体菌株选自MTLY37、过表达CPR和ALK1基因的MTLY79、过表达CPR和ALK2基因的MTLY80、过表达CPR基因的MTLY81、过表达CPR基因的FT120和过表达CPR基因的FT130，其中所述MTLY37来源于在Collection de Levures d'Intérêt Biotechnologique-CLIB中以CLIB89记录的ATCC 20460野生型菌株，并通过以下转化操作由在Collection de Levures d’Intérêt Biotechnologique-CLIB中以CLIB139记录的Pold菌株获得：，其中MTLY79来源于在Collection de Levures d’Intérêt Biotechnologique-CLIB中以CLIB89记录的ATCC 20460野生型菌株，并通过以下转化操作由MTLY74突变体获得，所述MTLY74突变体自身通过以下转化操作由MTLY37获得：，其中MTLY80来源于在Collection de Levures d’Intérêt Biotechnologique-CLIB中以CLIB89记录的ATCC 20460野生型菌株，并通过以下转化操作由MTLY74突变体获得：，其中MTLY81来源于在Collection de Levures d’Intérêt Biotechnologique-CLIB中以CLIB89记录的ATCC 20460野生型菌株，并通过以下转化操作由MTLY74突变体获得：，其中FT120来源于在Collection de Levures d’Intérêt Biotechnologique-CLIB中以CLIB89记录的ATCC 20460野生型菌株，并通过以下转化操作由MTLY66突变体获得：，其中FT130来源于在Collection de Levures d’Intérêt Biotechnologique-CLIB中以CLIB89记录的ATCC 20460野生型菌株，并通过以下转化操作由FT120突变体获得：。