PCR结合核酸探针斑点杂交技术检测病料中I型马立克氏病病毒感染

摘要

本发明涉及一种PCR结合核酸探针斑点杂交检测病料中I型马立克氏病病毒感染的方法。本发明将疑是I型马立克氏病病毒感染的动物(已死亡动物)组织样品DNA用针对I型马立克氏病病毒的特异性引物PCR扩增后，对PCR产物再用该病毒特异性核酸探针做斑点杂交，不仅能显示PCR产物的特异性，也大大提高了检出率。本发明试验结果表明，PCR结合核酸探针斑点杂交技术检测病料中I型马立克氏病病毒感染，可显著提高病毒感染检测的灵敏度和特异性。

主权项

一种PCR结合核酸探针斑点杂交检测病料中I型马立克氏病病毒感染的方法，其特征在于所述病料取自病死动物的肝脏、脾脏、心脏、肾脏、胸腺、骨髓，使用针对可疑病毒的特异性引物对病料DNA进行PCR扩增后，再用该可疑病毒的特异性核酸探针对PCR扩增产物做斑点杂交； 其中：扩增病料DNA的引物MDV‑pp38‑F2和MDV‑pp38‑R2，其序列如序列表中序列9和10所示；制备检测探针的引物MDV‑pp38‑F1和MDV‑pp38‑R1其序列如序列表中序列6和7所示。