一种卡那霉素A酶联适配体检测方法及应用

摘要

本发明涉及食品安全检测领域，具体地，公开了一种卡那霉素A酶联适配体检测方法及其应用。本发明通过链霉亲和素-生物素-适配体模式实现对卡那霉素A的测定，同时优化了检测条件，最终得到检测限最低的条件，该条件具有高灵敏、高特异性。该方法能够特异性检测牛奶、猪肉、鸡肉、猪肝、蜂蜜中的卡那霉素A，具有广阔的应用前景。

主权项

一种卡那霉素A酶联适配体检测方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.用碳酸盐缓冲液稀释链霉亲和素得1~64 μg/mL的包被缓冲液，将包被缓冲液加入微孔板中，每孔100~200 μL，包被过夜，洗涤微孔板后，加入封闭缓冲液封闭，最后烘干；    S2.用PBS缓冲液稀释5’端修饰有生物素的卡那霉素A的ssDNA 适配体得浓度为0.5~8 nmol/L的适配体溶液，将适配体溶液加入步骤S1的微孔板中，每孔100~200 μL，孵育，洗板后拍干；得固相适配体；S3.用辣根过氧化物酶标记卡那霉素A 分子形成标记竞争物KaA‑HRP；S4.将待测样品和KaA‑HRP同时加入步骤S2制备得到的固相适配体中，即可实现卡那霉素A的酶联适配体检测；所述卡那霉素A的ssDNA 适配体的序列如SEQ ID NO：1所示。