16种高危型和5种低危型HPV检测试剂盒

摘要

本发明涉及生物技术和医学领域，具体涉及一种使用杂交探针检测20种HPV亚型的试剂盒。本发明创造性的使用taqman探针与一种多重PCR方法结合来检测HPV基因型，所有的操作在一管内完成，操作简单，不需要开盖操作，避免了污染的发生；使用TM值来判断相应的HPV基因亚型；并且提供了特殊的固体形式储存方式，大大方便了运输和储存。此试剂盒主要用于检测20种HPV亚型，其中15种高危型包括：16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68；5种低危型包括6,11,40,55,70。

主权项

一种人类HPV基因分型的检测方法和试剂盒，其特征在于使用多重不对称PCR扩增，荧光杂交探针做溶解曲线以判断结果、以及包括固体形式存在的1xPCR反应物（由引物混合物、tris‑cl、Kcl、MgCl2 、热启动聚合酶、UNG酶、焦磷酸酶和冻干保护剂组成）、其特殊之处在于：a：特殊的三段式引物，其三段式引物设计及后继的扩增为独创的MAP（多重单链PCR扩增）技术，其序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2；b：特殊的探针，所选取的20个探针具有良好的特异性和保守性，可以根据不同的Tm值的判断基因亚型，探针序列为SEQ ID NO:3~SEQ ID NO. 22；c：特殊的存储条件:本试剂盒为PCR反应物提供了固体形式的存储方式。