一种从血浆组分四沉淀中制备高纯ApoA-I的生产工艺

摘要

本发明公开了一种从血浆组分四中纯化得到高纯ApoA-I的方法，包括下列步骤：血浆组分四沉淀溶解，离心除去硅藻土及杂质，收集上清液；上清液加入氯化钠使ApoA-I蛋白凝聚析出，离心获得ApoA-I沉淀；复溶ApoA-I沉淀并过滤；滤液先后经阴离子柱层析及疏水柱层析，分离获得高纯的ApoA-I溶液。本发明的方法工艺制备的ApoA-I具有很高的纯度，纯度可达95％以上，ApoA-I得率可达70％，且操作安全方便，容易实现工艺放大，非常适合工业化生产。

主权项

一种从血浆组分四中纯化得到ApoA‑I的方法，包括下列步骤：1）血浆组分四用pH8.00‑10.00的缓冲液溶解，离心除去硅藻土及杂质，收集上清液，血浆组分四溶解的方法为将血浆组分四在0‑8℃下溶解于pH8.00‑10.00的醋酸钠缓冲液中，所述血浆组分四是人血浆经Cohn低温乙醇法处理后的剩余部分，其主要蛋白成分是白蛋白和β脂蛋白；2）上清液加入氯化钠使ApoA‑I蛋白凝聚析出，离心获得ApoA‑I沉淀；3）复溶ApoA‑I沉淀并过滤，用于复溶ApoA‑I的复溶液为注射用水或1‑3wt%的氯化钠水溶液，复溶液的pH值为8.0‑9.0，温度为0‑10℃；4）步骤3的滤液先后经阴离子柱层析及疏水柱层析，分离获得纯化的ApoA‑I溶液，所述阴离子柱层析采用DEAE阴离子层析柱，所述疏水柱层析采用butyl疏水柱。