发明名称 |
一种TEV蛋白酶表达工程菌及其构建和应用 |
摘要 |
本发明涉及一种基于基因组的TEV蛋白酶表达体系。本体系是将受T7强启动子驱动的与麦芽糖结合蛋白基因malE融合的TEV蛋白酶基因和氯霉素抗性基因一起通过来源于λ噬菌体的重组酶所介导的同源重组方法整合至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)基因组中,并取代基因组中的malE基因区域而获得。所采用的是大肠杆菌表达菌株CGMCC No.7482。TEV蛋白酶可以采用亲和层析一步纯化,产量可达4.2mg/L。分离纯化TEV蛋白酶具有良好的酶切活性。本TEV蛋白酶表达体系可成为表达和纯化TEV蛋白酶的常规手段。 |
申请公布号 |
CN103275917A |
申请公布日期 |
2013.09.04 |
申请号 |
CN201310224441.5 |
申请日期 |
2013.06.04 |
申请人 |
南京师范大学 |
发明人 |
尚广东;张飞飞;柴美霞;李玲 |
分类号 |
C12N1/21(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N9/50(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N |
主分类号 |
C12N1/21(2006.01)I |
代理机构 |
南京知识律师事务所 32207 |
代理人 |
卢亚丽 |
主权项 |
一种TEV蛋白酶表达工程菌,是大肠埃希氏菌(Escherichia coli)CGMCC No.7482。 |
地址 |
210046 江苏省南京市亚东新城区文苑路1号 |