胭脂鱼亲子鉴定的方法与试剂盒

摘要

胭脂鱼亲子鉴定的方法，包括以下步骤（1）胭脂鱼个体DNA提取；（2）胭脂鱼微卫星标记的筛选；（3）胭脂鱼微卫星荧光标记的合成和PCR扩增；（4）胭脂鱼亲子鉴定技术的建立。胭脂鱼亲子鉴定的试剂盒，包括：10mM/L的10×PCR Buffer，25mmol/L的MgCl2，10mM/L的dNTPs，10mM/L的17个微卫星标记（F.R），5U/μL的rTaq Enzyme及ddH2O。本发明可以实现胭脂鱼养殖场人工繁殖以及建立胭脂鱼家系谱系提供依据，指导胭脂鱼人工增殖放流，提高胭脂鱼繁殖的成活率。

主权项

胭脂鱼亲子鉴定的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤（1）、胭脂鱼个体DNA提取：提取胭脂鱼亲本和子代DNA备用；（2）、胭脂鱼微卫星标记的筛选：将69对微卫星标记合成非荧光标记引物之后PCR扩增，初步筛选分离多态性高的的引物进一步进行温度梯度筛选并进行群体分析；（3）、胭脂鱼微卫星荧光标记的合成和PCR扩增：筛选得到17对多态性高并且能稳定扩增的微卫星标记，分别标上2种荧光引物，然后以每2对引物扩增的PCR产物混合之后读取等位基因值；（4）、胭脂鱼亲子鉴定技术的建立：挑选一组胭脂鱼个体单独进行受精孵化养殖，提取30个个体DNA作为子代群体，同时选取繁殖亲本10尾用于候选亲本用于建立亲子鉴定体系，进行亲子鉴定分析。