发明名称 禽流感病毒H7型RT-PCR检测试剂盒及检测方法
摘要 本发明涉及禽流感病毒H7型RT-PCR检测试剂盒及检测方法。目的是提供的检测试剂盒应具有使用方便、检测准确的特点,提供的方法应具有检测准确性高、检测简单方便的特点。技术方案是:禽流感病毒H7型荧光定量RT-PCR检测试剂盒,包括脱氧三磷酸核苷、MgCl2、RT-PCR缓冲液、禽流感病毒H7基因标准品、RNA酶抑制剂、MMLV逆转录酶以及DNA聚合酶;其特征在于荧光定量RT-PCR检测试剂盒还包括上游引物、下游引物和特异性探针;一种禽流感病毒H7型荧光定量RT-PCR检测方法,按以下步骤进行:(1)提取样品RNA;(2)进行RT-PCR反应;(3)对RT-PCR反应产物进行荧光检测。
申请公布号 CN103276108A 申请公布日期 2013.09.04
申请号 CN201310175739.1 申请日期 2013.05.10
申请人 浙江省疾病预防控制中心 发明人 夏时畅;张严峻;李辉
分类号 C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N 主分类号 C12Q1/70(2006.01)I
代理机构 杭州九洲专利事务所有限公司 33101 代理人 王洪新
主权项 禽流感病毒H7型荧光定量RT‑PCR检测试剂盒,包括脱氧三磷酸核苷、MgCl2、RT‑PCR缓冲液、禽流感病毒H7基因标准品、RNA酶抑制剂、MMLV逆转录酶以及DNA聚合酶;其特征在于所述荧光定量RT‑PCR检测试剂盒还包括上游引物、下游引物和特异性探针,所述上游引物、下游引物和特异性探针的序列如下:上游引物H7‑FP:5’‑CACTGCARAATAGAATACAGATWGAC‑3’下游引物H7‑RP:5’‑GTGCACYGCATGTTTCCATT‑3’探针特异性H7‑P:5’‑FAM‑TTATGGTTTAGCTTCGGGGCATCATG‑BHQ1‑3’,其中FAM‑为荧光报告基团,BHQ1为荧光淬灭基团;所述流感病毒H7基因标准品的序列如下:CAATGCAAAATAGAATACAGATTGACCCAGTCAAACTAAGCAGCGGCTACAAAGATGTGATACTCTGG TTTAGCTTCGGGGCATCATGTTTCATACTTCTAGCCATTGCAATGGGCCTTGTTTTCATATGTGTGAA GAATGGAAACATGCGGTGCAC。
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