对虾丝氨酸蛋白酶抑制剂的基因工程制备与鉴定方法

摘要

本发明公开了一种对虾丝氨酸蛋白酶抑制剂基因工程的制备与质谱鉴定方法。Serpin家族成员通过调节一系列丝氨酸蛋白酶的活性来调节蛋白酶级联反应，在调节机体免疫及其它重要生理功能方面发挥着重要作用。我们在前期研究中，从明对虾血细胞中克隆得到一个serpin型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因（Fc-serpin,GenBank注册号：DQ318857），初步研究显示它在转录水平参与了病原菌和白斑杆状病毒（WSSV）引发的对虾先天免疫应答反应。本发明利用基因工程的方法成功获得了重组对虾serpin型蛋白酶抑制剂，其分子量约为45kD，纯化复性后得率为0.3g/L培养基，质谱鉴定结果验证了重组蛋白的正确性。本发明中重组目的蛋白的获得为研究对虾Fc-serpin基因的免疫学功能和调控机制奠定了基础。

主权项

一种重组对虾Fc‑serpin型蛋白酶抑制剂，其特征在于该重组蛋白酶抑制剂的蛋白分子量约为45kD，纯化复性后得率为0.3g/L培养基。