用于测定莠去津生物毒性的铜绿微囊藻藻液的制备方法

摘要

本发明公开了一种用于测定莠去津生物毒性的铜绿微囊藻藻液的制备方法，其步骤包括：A、铜绿微囊藻的培养；B、铜绿微囊藻叶绿素荧光参数的确定，使用荧光光谱仪进行叶绿素荧光参数的测定；C、稀释至不同浓度的铜绿微囊藻与其光密度关系测定；D、铜绿微囊藻浓度-叶绿素荧光曲线的建立；E、用于测定莠去津生物毒性铜绿微囊藻藻液的获取，用经过高压灭菌的蒸馏水稀释生长至对数期的铜绿微囊藻，使其在680nm处的OD值为0.3-0.5，该稀释后的藻液即可用于莠去津生物毒性测定。利用本发明制备的藻液能够简便、快速的测定莠去津的生物毒性，成本低廉，绿色环保。

主权项

用于测定莠去津生物毒性的铜绿微囊藻藻液的制备方法，其特征步骤包括：A、铜绿微囊藻的培养：取铜绿微囊藻藻种，配制BG‑11培养基,然后将培养基灭菌、冷却，于无菌条件下进行藻种接种；接种完成，置于恒温光照培养箱中培养；将生长至对数期的藻按比例转接到灭菌培养基中，如此反复转接，使其达到同步生长；B、铜绿微囊藻叶绿素荧光参数的确定：使用荧光光谱仪进行叶绿素荧光参数的测定；对铜绿微囊藻进行波长扫描，确定铜绿微囊藻叶绿素荧光的最佳激发波长Ex／发射波长Em为435nm／680nm；C、稀释至不同浓度的铜绿微囊藻与其光密度关系测定：用灭菌的蒸馏水对生长至对数期的铜绿微囊藻进行稀释，稀释成一系列不同浓度，用铜绿微囊藻所占百分数表示；然后使用可见分光光度计，测定稀释至不同浓度的铜绿微囊藻在680nm处的光密度OD值，绘制藻液浓度与光密度的关系曲线，同时计算其回归方程；D、铜绿微囊藻浓度‑叶绿素荧光曲线的建立：使用荧光光谱仪在435nm／680nm波长下测定稀释至不同浓度的铜绿微囊藻的叶绿素荧光强度，绘制铜绿微囊藻藻液浓度对应的光密度与叶绿素荧光强度的关系曲线，其中光密度在0～0.74范围内光密度与叶绿素荧光强度呈线性正相关关系，计算其回归方程；E、用于测定莠去津生物毒性铜绿微囊藻藻液的获取：根据步骤 D建立的铜绿微囊藻藻液光密度和叶绿素荧光强度的关系曲线，选定OD值为0.3‑0.5的铜绿微囊藻藻液浓度作为检测莠去津生物毒性的藻的浓度；用经过高压灭菌的蒸馏水稀释生长至对数期的铜绿微囊藻，使其在680nm处的OD值为0.3‑0.5，该稀释后的藻液即可用于莠去津生物毒性测定。