一种增强试纸检测信号的方法

摘要

一种增强试纸检测信号的方法，先制备空白侧向流试纸条，再选择或制备指示颗粒和增强颗粒，然后确定捕获分子、检测分子、对照分子、第一增强分子和第二增强分子，将检测分子和对照分子分别配置成检测溶液和对照溶液，加在试纸层析膜上，构成检测区和对照区，制备颗粒聚合物，将制得的颗粒聚合物加在试纸结合垫上作为显色颗粒，将结合垫晾干，取干燥后的试纸条，将其结合垫一端浸润于待测样品中，保持溶液不与颗粒聚合物接触，待吸收垫部分润湿后，取出试纸，观察检测区和对照线区，检测区和对照区均显色，表明结果为阳性；检测区未显色，对照区显色，表明结果为阴性；对照区未显色，结果不可靠，需重复检测，本发明简单而通用。

主权项

一种增强试纸检测信号的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）制备空白侧向流试纸条，先将结合垫、层析膜以及吸收垫按顺序粘贴于支持垫上，其中层析膜在中间，结合垫和吸收垫在两端，结合垫、吸收垫均与层析膜重合1～5mm，然后将其裁剪成2～8mm宽的试纸条，所述结合垫用以承载显色颗粒，材料为玻璃纤维膜或聚酯纤维膜；所述层析膜用以固定检测分子和对照分子，材料为尼龙膜、聚酯膜、PVDF膜、醋酸纤维素膜或硝酸纤维素膜；所述吸收垫用以吸收反应液，给试纸溶液流动提供驱动力，材料为纤维素、棉仔绒或棉纤维；所述支持垫用作支持物，给试纸提供力学强度，材料为聚氯乙烯或聚苯乙烯；2）选择或制备指示颗粒和增强颗粒，指示颗粒的粒度为10N nm，用于指示试纸检测信号，能够天然显色或化学发光，具体包括金、硒、四氧化三铁或稀土纳米颗粒；增强颗粒的粒度为10M nm，用于增强试纸检测信号，具体为金、硒、四氧化三铁和稀土纳米颗粒中任一种，其中1≤N≤M≤10；3）确定捕获分子、检测分子、对照分子、第一增强分子和第二增强分子。捕获分子不仅能和目标物特异性结合，而且能和指示颗粒结合；检测分子能和目标物特异性结合，对照分子能和捕获分子特异性反应结合，检测分子和对照分子都能和层析膜结合；第一、第二增强分子能相互特异性结合，此外第一增强分子能和指示颗粒结合，第 二增强分子能和增强颗粒结合；4）以含1%～10%（v/v）甲醇、乙醇或异丙醇的水、TAE缓冲液、TBE缓冲液或PBS缓冲液为溶剂，PBS缓冲液为10‑～100mM，pH=7.4，将检测分子和对照分子分别配置成检测溶液和对照溶液，浓度为1μM～1mM，各取两种溶液0.2～0.8μL加在试纸层析膜上，构成相应的检测区和对照区，两个区域距离间隔为1mm～1cm，将层析膜晾干；5）将捕获分子和第一增强分子按摩尔比10N:(1～10)混合，将混合分子和10N nm的指示颗粒按摩尔比(30～60)N2:1混合形成第一颗粒缀合物，将第二增强分子与10M nm的增强颗粒按(30～60)M2:1混合形成第二颗粒缀合物，将第一颗粒缀合物和第二颗粒缀合物按摩尔比(1～10)M:N混合，制得颗粒聚合物；将制得的颗粒聚合物加在试纸结合垫上作为显色颗粒，将结合垫晾干；6）取干燥后的试纸条，将其结合垫一端浸润于待测样品中，保持溶液不与颗粒聚合物接触，待吸收垫部分润湿后，取出试纸，观察检测区和对照线区，检测区和对照区均显色，表明结果为阳性；检测区未显色，对照区显色，表明结果为阴性；对照区未显色，结果不可靠，需重复检测。