一种利用固定化海藻糖合成酶生产海藻糖的方法

摘要

本发明涉及一种利用固定化海藻糖合成酶生产海藻糖的方法，包括如下步骤：（1）将产酶菌株接种于发酵培养基中，培养30h～80h，制得发酵液；（2）将发酵液经菌体分离、菌体破壁、酶纯化，制得的海藻糖合成酶液；（3）进行交联包埋反应，制得固定化海藻糖合成酶；（4）将固定化海藻糖合成酶与麦芽糖底物溶液混合，经转化、分离，制得海藻糖。本发明转化率高、反应速度快、作用时间短、酶活稳定性及机械强度高的固定化海藻糖合成酶，从而提高了海藻糖的生产效率，降低了生产成本，缩短了生产周期。

主权项

一种利用固定化海藻糖合成酶生产海藻糖的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将产酶菌株接种于发酵培养基中，在温度28℃～33℃的条件下，培养30h～80h，制得发酵液；上述发酵培养基组分如下，均为重量百分比：麦芽糖1%～10%，蛋白胨0.4%～2%，牛肉膏0.2%～1%，KH2PO40.1%～1%，MgSO4·7H2O0.01%～0.12%，余量水，pH6.0～8.0；上述产酶菌株选自热带假丝酵母（Candida tropicalis）、大肠杆菌（Escherichia coli）、玫瑰微球菌（Kocuria roseus）、谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）、灰色链霉菌（Streptomvces avermitilis）、玫瑰链霉菌（Streptomyces roseoflavus）、金黄色节杆菌（Arthrobacter aurescens）、恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）或腾冲嗜热杆菌（Thermoanaerobacter tengcongensis）之一；（2）将步骤（1）制得的发酵液经菌体分离、菌体破壁、酶纯化，制得的海藻糖合成酶液的酶活为35U/g湿菌体～60U/g湿菌体；（3）在戊二醛质量浓度为0.3%～1%，海藻糖合成酶液与壳聚糖凝胶的体积质量比为1:1～6:1、pH7.0～8.5、温度12℃～25℃的条件下，体积质量比单位为ml/g，进行交联包埋反应9h～20h，制得固定化海藻糖合成酶；（4）将步骤（3）制得的固定化海藻糖合成酶与麦芽糖底物溶液混合，经转化、分离，制得海藻糖。