发明名称 |
一种电击转化枯草芽孢杆菌的方法 |
摘要 |
本发明提供了一种电击转化枯草芽孢杆菌的方法,包括制备感受态细胞和电击转化两个步骤;其中,制备感受态细胞包括如下步骤:将枯草芽孢杆菌在LB培养基中活化,将活化后的枯草芽孢杆菌接种于SLB培养基中,振荡培养,培养至OD600nm=0.7;SLB培养基的制备方法为:将10g蛋白胨,5g酵母粉,10gNaCl,0.5mol山梨醇和蒸馏水充分混匀,并用蒸馏水定容至1L;电击转化包括如下步骤:将待转化的质粒与所述感受态细胞混匀并冰浴,进行电击,得到导入所述待转化质粒的重组枯草芽孢杆菌。应用本发明的方法,转化效率可达8×106cfu/μg,大大提高了枯草芽孢杆菌的转化效率。 |
申请公布号 |
CN103266127A |
申请公布日期 |
2013.08.28 |
申请号 |
CN201310160840.X |
申请日期 |
2013.05.03 |
申请人 |
安徽工程大学 |
发明人 |
薛正莲;苏燕南;王洲;马琦亚;赵世光;杨超英 |
分类号 |
C12N15/75(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/75(2006.01)I |
代理机构 |
北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 |
代理人 |
高松 |
主权项 |
一种电击转化枯草芽孢杆菌的方法,包括制备感受态细胞和电击转化两个步骤;其中,所述制备感受态细胞依次包括如下步骤:将枯草芽孢杆菌在LB培养基中活化,将活化后的枯草芽孢杆菌接种于SLB培养基中,振荡培养,培养至OD600nm=0.7;所述SLB培养基的组分为:1%(W/V)蛋白胨,0.5%(W/V)酵母粉,1%(W/V)NaCl,0.5mol/L山梨醇,其余为蒸馏水;所述电击转化包括如下步骤:将待转化的质粒与所述感受态细胞混匀并冰浴,进行电击,得到导入所述待转化质粒的重组枯草芽孢杆菌。 |
地址 |
241000 安徽省芜湖市北京中路8号安徽工程大学生物与化学工程学院 |