一种同时检测烟草中生物碱及亚硝胺的方法

摘要

本发明公开了一种同时检测烟草中生物碱及亚硝胺的方法，属于烟草化学成分检测技术领域。所述方法包括样本萃取、净化、分析、定量工序，首先在烟叶粉末中加入内标溶液和超纯水，超声萃取后将萃取液过滤膜，然后加入甲醇，振摇后离心去蛋白，取上清液进液相色谱-质谱分析。采用混合配置法制备不同浓度梯度的待测化合物标准溶液，进液相色谱-质谱分析后，绘制化合物仪器响应对溶液实际浓度的标准曲线，拟合曲线方程，并根据待测化合物仪器响应的实测值计算出检测浓度，换算成烟草样品中待测化合物的实际浓度。本发明所述检测方法能够同时对烟草样品中的生物碱及亚硝胺类物质进行定性定量分析，且操作简便、重现性好、分析灵敏度高、定量准确。

主权项

1.一种同时检测烟草中生物碱及亚硝胺的方法，其特征在于包括样本萃取、净化、分析、定量工序，具体包括：A、萃取：在烟叶粉末中加入内标溶液和去超纯水，超声萃取；B、净化：将萃取液过0.22μm滤膜后，加入甲醇，振摇后离心；C：分析：取上清液进样分析；分析所用色谱柱为Water BEH C18（2.1mm×50mm×1.7μm），柱温为30~40℃，流动相A为0.2mmol/L的乙酸铵水溶液，流动相B为0.2mmol/L的乙酸铵甲醇溶液，流动相梯度为100%A0%B保持0~1min，40%A60%B保持1~2.1min，0%A100%B保持2.1~3min，100%A0%B保持3~4min，流速0.6ml/min；离子源为电喷雾电离源，扫描方式为正离子扫描，电喷雾电压为4000v，离子源温度为750℃，离子源气体1为氮气，压力70psi，气体2为氮气，压力50psi；D、定量：采用混合配置法制备不同浓度梯度的待测化合物标准溶液，分别对各浓度的标准溶液进行液相色谱-质谱分析，绘制化合物仪器响应对实际浓度的标准曲线，并拟合曲线方程，将待测化合物的仪器响应代入标准曲线拟合方程，即可求得待测化合物的检测浓度，根据下述公式计算烟草样品中待测化合物的实际浓度：式中，c为烟草样品中生物碱或亚硝胺的含量，单位μg/g；x为仪器测得的萃取液的浓度，单位为μg/ml。