发明名称 | 多肽或蛋白质含量标准物质定值方法 | ||
摘要 | 本发明公开了一种多肽或蛋白含量标准物质定值方法,该方法包括如下步骤:高效液相色谱分离待测样品中的主要成分和杂质;收集分离出的各个组分,将各个组分分别水解为氨基酸,得到各个组分的水解液;向所述各个组分的水解液中加入同位素标记的稳定氨基酸,通过高效液相色谱-同位素稀释质谱法,以国家氨基酸标准物质为标准,测定各个组分中氨基酸的质量分数,计算主要成分水解得到的氨基酸的比例系数;将待测样品水解为氨基酸,得到待测样品水解液,向所述待测样品水解液中加入同位素标记的稳定氨基酸,通过高效液相色谱-同位素稀释质谱法,以国家氨基酸标准物质为标准,测定待测样品水解液中氨基酸的质量分数;计算待测样品中多肽和蛋白的质量分数。本发明的多肽或蛋白含量含量标准物质定值方法准确性高,定值结果可最终溯源到SI单位。 | ||
申请公布号 | CN102279227B | 申请公布日期 | 2013.08.21 |
申请号 | CN201010194602.7 | 申请日期 | 2010.06.08 |
申请人 | 中国计量科学研究院 | 发明人 | 武利庆;王晶;杨彬 |
分类号 | G01N30/02(2006.01)I | 主分类号 | G01N30/02(2006.01)I |
代理机构 | 北京双收知识产权代理有限公司 11241 | 代理人 | 卢新 |
主权项 | 1.多肽或蛋白含量标准物质定值方法,包括如下步骤:高效液相色谱分离待测样品中的主要成分和杂质;收集分离出的各个组分,将各个组分分别水解为氨基酸,得到各个组分的水解液;向所述各个组分的水解液中加入同位素标记的稳定氨基酸,通过高效液相色谱-同位素稀释质谱法,以国家氨基酸标准物质为标准,测定各个组分中氨基酸的质量分数,计算主要成分水解得到的氨基酸的比例系数;将待测样品水解为氨基酸,得到待测样品水解液,向所述待测样品水解液中加入同位素标记的氨基酸,通过高效液相色谱-同位素稀释质谱法,以国家氨基酸标准物质为标准,测定待测样品水解液中氨基酸的质量分数;根据如下公式计算待测样品中多肽或蛋白的质量分数:<img file="FDA00002573034700011.GIF" wi="942" he="162" />R<sub>AA</sub>:氨基酸的比例系数;MW<sub>AA</sub>:氨基酸的相对分子质量;MW<sub>待测样品</sub>:待测样品的相对分子质量;M<sub>AA</sub>:待测样品水解液中氨基酸的质量分数;N:待测样品每个分子中氨基酸的个数。 | ||
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