一种穿透型TAT-TALEN蛋白及内源性基因被敲除的细胞的制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种穿透型TAT-TALEN蛋白及内源性基因被敲除的细胞的制备方法和应用。穿透型TAT-TALEN蛋白是在TALEN蛋白的L链和R链的N端还具有细胞穿透多肽TAT，所述的细胞穿透多肽TAT的氨基酸序列为：N端-TyrGlyArgLysLysArgArgGlnArgArgArg-C端。本发明的穿透型TAT-TALEN蛋白能够敲除细胞内源性基因，尤其可以敲除细胞内源性CCR5基因，因此可将其应用于临床上艾滋病基因治疗中的CCR5基因敲除。应用本发明在对CCR5基因进行敲除的同时没有引入任何的外源基因，不存在随机插入到细胞的基因组中引起插入型突变的风险，并且TAT-TALEN蛋白进入细胞发挥作用后会逐渐被细胞降解不会一直存在于细胞内。

主权项

一种能够敲除细胞内源性基因的穿透型TAT‑TALEN蛋白，其特征在于，其是在TALEN蛋白的L链和R链的N端还具有细胞穿透多肽TAT，所述的细胞穿透多肽TAT的氨基酸序列为：N端‑TyrGlyArgLysLysArgArgGlnArgArgArg‑C端。