发明名称 一种用于从孢子捕捉器的捕捉带上提取小麦白粉菌DNA的方法
摘要 本发明“一种用于从孢子捕捉器的捕捉带上提取小麦白粉菌DNA的方法”可用于提取经孢子捕捉器收集到的白粉菌分生孢子的DNA,属于植物病害流行监测领域。该发明首先通过对孢子捕捉器捕捉带上收集到的小麦白粉菌的分生孢子进行洗脱和破壁,然后对破壁后分生孢子的DNA进行提取和纯化,从而为利用分子生物学定量研究技术开展病害的发生流行监测服务。该发明提取的DNA不仅可用用来准确定量检测孢子捕捉器收集到的小麦白粉菌分生孢子,而且还可直接用于抗药性监测。此技术可作为病害监测技术在各地推广应用。
申请公布号 CN103255129A 申请公布日期 2013.08.21
申请号 CN201210039038.0 申请日期 2012.02.21
申请人 中国农业科学院植物保护研究所 发明人 曹学仁;周益林;骆勇;段霞瑜;陈万权
分类号 C12N15/10(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 1.在一种用于从孢子捕捉器的捕捉带上提取小麦白粉菌DNA的方法发明中,主要涉及一种对孢子捕捉器捕捉带上所收集的小麦白粉菌分生孢子洗脱和破壁的合适方法为:将捕捉带剪成6段,放入2ml离心管中,加入400μl Nonidet P-40和0.2g直径为400-600μm的玻璃珠,在65℃下温育30min。在<img file="FSA00000672734800011.GIF" wi="229" he="48" />仪器上以6m/s震荡40s 2次后在冰上放置2min,然后再以6m/s震荡40s 2次,可把捕捉带洗脱白粉菌分生孢子洗脱下来,并得到破壁的病菌孢子悬浮液,然后用常规方法或试剂盒的提取方法进行DNA的提取和纯化。
地址 100193 北京市海淀区圆明园西路2号
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