促甲状腺激素受体基因突变位点检测试剂盒、使用方法和应用

摘要

本发明公开了一种促甲状腺激素受体基因突变位点检测试剂盒及其使用方法和应用，本发明的试剂盒包括：1）荧光PCR检测混合液；2）Taq酶；3）TSHR野生型阳性对照品；4）TSHR突变型阳性对照品；5）ddH2O。本发明的试剂盒通过荧光定量PCR法对TSHR蛋白623位点和/或631位点的编码基因进行检测，判断是否有所述编码基因的突变，进而判断是否存在甲状腺激素受体蛋白623位点和/或631位点突变。该蛋白位点的突变可以用于甲状腺疾病的辅助诊断和预防，具有实时检测、定量和高通量检测等特点，且操作简便、灵敏度高、特异性好。

主权项

一种促甲状腺激素受体基因突变位点检测试剂盒，所述试剂盒包括针对促甲状腺激素受体蛋白623位点突变的TSHR623体系和/或针对促甲状腺激素受体蛋白631位点突变的TSHR631体系：所述TSHR623体系包括TSHR623位点荧光PCR混合液、Taq酶、TSHR野生型阳性对照品、TSHR623位点突变型阳性对照品；所述TSHR623位点核酸荧光PCR混合液含有1)引物、2)623‑野生型探针、3)623‑突变型探针、4）RT‑PCR MIX、5)ddH2O；所述引物能特异性扩增包含TSHR蛋白623位点编码基因在内的一段TSHR基因片段，所述623‑野生型探针能特异性识别并结合未发生突变的TSHR蛋白623位点编码基因，所述623‑突变型探针能特异性识别并结合发生突变的TSHR蛋白623位点编码基因；所述TSHR631体系含有TSHR631位点荧光PCR混合液、Taq酶、TSHR野生型阳性对照品、TSHR631位点突变型阳性对照品；所述TSHR631位点核酸荧光PCR混合液含有1)引物、2)631‑野生型探针、3)631‑突变型探针、4）RT‑PCR MIX、5)ddH2O；所述引物能特异性扩增包含TSHR蛋白631位点编码基因在内的一段TSHR基因片段，所述631‑野生型探针能特异性识别并结合未发生突变的TSHR蛋白631位点编码基因，所述631‑突变型探针能特异性识别并结合发生突变的TSHR蛋白631位点编码基因；所述探针均为荧光标记探针；所述623体系与631体系的引物序列相同，扩增含TSHR蛋白623位点编码基因和631位点编码基因在内的一段TSHR基因片段；所述引物序列为SEQ ID NO:1～2；所述TSHR623体系的623‑野生型探针序列为SEQ ID NO:3，所述623‑突变型探针包括623‑1型突变探针、623‑2型突变探针和623‑3型突变探针，探针序列分别为SEQ ID NO:4～6；所述TSHR631体系的631‑野生型探针序列为SEQ ID NO:7，所述631‑突变型探针序列为SEQ ID NO:8。