食用油中脱氧核糖核酸的提取方法

摘要

本发明涉及一种食用油中脱氧核糖核酸的提取方法，首先向食用油中加入脱氧核糖核酸提取液，超声乳化后分离出含脱氧核糖核酸的水相；然后向水相中加入脱氧核糖核酸沉淀剂，沉淀出脱氧核糖核酸。提取过程中通过低能量超声乳化富集样品中的DNA，缩短了样品的前处理时间，耗时短，提高了DNA的提取效率，并且避免了待检测样品之间的交叉污染，提取结果更准确可靠。

主权项

一种食用油中脱氧核糖核酸的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：向食用油中加入脱氧核糖核酸提取液，超声乳化后分离出含脱氧核糖核酸的水相；步骤二：向所述水相中加入脱氧核糖核酸沉淀剂，沉淀出所述脱氧核糖核酸；所述脱氧核糖核酸提取液为40～60mmol/L的乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸钠溶液、400～600mmol/L的氯化钠溶液、质量浓度为1.8%～2.5%的十二烷基磺酸钠溶液、质量浓度为0.8%～1.2%的聚乙烯吡咯烷酮溶液与pH为7.8～8.2、浓度为80～120mmol/L的三羟甲基氨基甲烷‑氯化氢溶液组成的混合溶液，所述脱氧核糖核酸提取液与所述食用油的体积比为1:8～12，所述超声功率为50～180瓦、频率为20～40kHz，超声处理时间为30秒～2分钟，所述脱氧核糖核酸沉淀剂为异丙醇与浓度为2.0～4.0mol/L的乙酸盐溶液的混合物，其中，异丙醇与乙酸盐溶液的体积比为1:4～8，所述步骤二中，加入脱氧核糖核酸沉淀剂之前，还包括如下步骤：向水相中加入食用油萃取剂对所述水相中残存的食用油进行萃取，充分混匀后进行离心处理，收集水相；其中，食用油萃取剂与萃取前的水相的体积比为1～2:1，食用油萃取剂为氯仿与异戊醇的混合溶剂，混合溶剂中氯仿与异戊醇的体积比为18～30:1。