猪细小病毒灭活疫苗的制备方法及其产品

摘要

本发明公开了猪细小病毒灭活疫苗的制备方法，包括：(1)将猪细小病毒弱毒株接种ST细胞，培养得到生产种毒；(2)将处理后的微载体加入到生物反应器中的细胞生长液中，搅拌；(3)将ST细胞接入到生物反应器中的微载体中进行细胞的繁殖培养；(4)将猪细小病毒生产种毒感染生物反应器中悬浮培养的ST细胞进行病毒的繁殖培养；(5)收获繁殖的病毒液，灭活，配苗，即得。本发明方法细胞维持时间长，细胞活力高、活细胞密度大，有利于病毒的持续繁殖，所制备的病毒液病毒滴度高。本发明方法的生产过程衔接紧密、顺畅，规模放大容易，猪细小病毒的收获方便，质量稳定，可显著降低生产成本、有效提高疫苗产量和质量。

主权项

一种猪细小病毒灭活疫苗的制备方法，包括：(1)将猪细小病毒（Porcineparvo viurs）弱毒株接种ST细胞，培养得到生产种毒;(2)将预处理后的微载体按照每升细胞生长液中含有5‑7g的微载体的配比比例加入到细胞生长液中,搅拌，搅拌速度为40rpm，搅拌时间为30min;(3)将ST细胞按密度1×105个/ml接入到生物反应器的微载体中进行培养，首先在转速为80rpm的速度下搅拌3分钟，再将转速调整为50rpm;(4)ST细胞密度达l×1O7/mL时，将猪细小病毒生产种毒以感染复数为0.01MOI感染生物反应器中悬浮培养的ST细胞,搅拌,采用灌注培养法进行病毒的繁殖培养；(5)收获繁殖的病毒液,灭活,配苗,即得；其中，所述的微载体为Cytodex‑1型微载体；所述的预处理方式包括:硅化、水化和平衡；其中，步骤（4）中所述的灌注培养的温度为35℃，培养液的pH值为7.4，搅拌速度为50‑60rpm；所述的猪细小病毒弱毒株是猪细小病毒弱毒L株，其微生物保藏号是：CGMCC No.3352。