主权项 |
一种鹿茸细胞培养方法,其特征在于采用鹿茸细胞进行悬浮培养以获取更多的鹿茸细胞,所述方法使用的培养基配方为MEM基础液,补充1.5g/L葡萄糖,0.01mmol/L非必需氨基酸,5~10%小牛血清;其中鹿茸细胞是以无菌手术机械法切割鹿茸组织,使其成为细小组织块,置入培养箱进行培养,收集足够的单层细胞,再以搅动式培养瓶培养,每3~5天传代一次,连续传代20~40次,细胞量达106/ml;悬浮培养条件为:37℃下,pH7.1,60‑80rpm转速,溶解氧50%,空气饱和通气量0.1Lpm,待生长量达到最佳时分别按照0.92、3.08和3.85的灌注率分批进行灌注和分批收获。 |