微生物发酵植物油脂脱臭馏出物生产植物甾醇的方法

摘要

本发明属生物化工领域，特别涉及微生物发酵植物油脂脱臭馏出物生产植物甾醇的方法。该方法使用微生物发酵植物油脂脱臭馏出物，脱臭馏出物中的游离脂肪酸作为微生物的营养物质而被直接代谢利用。脱臭馏出物中的甘油酯在微生物所产生的脂肪酶、酯酶等水解酶的作用下水解为小分子物质，然后被微生物细胞吸收利用，转化为细胞物质。当游离脂肪酸、甘油酯被消化利用后，便将与之结合的植物甾醇释放发酵液中，发酵液经过微滤除去其中的微生物细胞；由于植物甾醇不溶于水，滤液经浓缩后冷析即可分离出植物甾醇。本发明极大地简化了生产工艺，减少了能源消耗，降低了生产成本，同时，由于不使用有机溶剂，无环境污染，经济效益显著。

主权项

一种微生物发酵植物油脂脱臭馏出物生产植物甾醇的方法，其特征是，它包括以下步骤：a、发酵植物油脂脱臭馏出物的微生物用于发酵植物油脂脱臭馏出物的微生物为热带假丝酵母；b、培养基的配制及灭菌于1L水中，加入60～80g脱臭馏出物、0.5～2g酵母粉、0.5～1g硫酸镁、3～5g磷酸氢二钾，pH值6.5～7.0，按照所述配比，将各种成分称重后加入机械搅拌式发酵罐中，室温下搅拌均匀，制得脱臭馏出物发酵培养基；然后向发酵罐通入蒸汽开始灭菌，待罐温上升到118℃～121℃，保温30分钟，灭菌结束后，引入冷却水将培养基温度降至25℃～30℃；c、发酵按照8％～10％的接种量将热带假丝酵母菌液接种到步骤b所述发酵罐中的培养基之中，控制发酵温度28℃～37℃，机械搅拌转速150rpm～180rpm，通气量0.8～1.1vvm，pH值6.0～6.5，发酵90～96小时；d、冷却、过滤发酵结束后，将步骤c所述发酵液泵至储料罐并降温至0℃～5℃，这时在发酵液上部形成一层蜡状固体物，其中含有60％～70％的天然维生素E，用来进一步提取天然维生素E；打开储料罐底部的放料阀，将下部的发酵液泵至发酵液储罐，而蜡状固体物仍保留在储料罐中，打开储料罐的热水阀，将罐温升至25℃～30℃，这时蜡状固体物融化为黄褐色液体，然后泵至另一储罐，对于所分离出的发酵液，采用陶瓷微滤膜进行微滤，除去其中的酵母细胞；所述微滤操作条件：0.22微米直径管式陶瓷膜，控制料液温度30℃，压力0.16～0.18Mpa，稳定膜通量100～120L/hm2；透过微滤膜的发酵液中含有4.7～12.8g/L植物甾醇，将截留液的酵母细胞，收集、干燥后用作动物饲料；e、浓缩采用旋转真空浓缩器，在温度70℃～80℃、真空度82～90KPa的条件下浓缩步骤d中的发酵液，使得其中植物甾醇浓度提高至100～120g/L；f、冷析、干燥将步骤e中浓缩后的发酵液降温至0℃～5℃冷析结晶6～8小时，随后进行过滤，滤饼用去离子水洗涤3次，40℃～50℃冷风干燥即得粗甾醇产品。