千层金再生体系建立的方法

摘要

本发明涉及“千层金再生体系建立的方法”，属于生物技术领域。本发明采用幼嫩叶片作为外植体，在合适的生长素及细胞分裂素浓度下，采用MS培养基培养，其伤口处皮层可分化形原始体并直接再生不定芽，并经过壮苗，生根培养，最后炼苗，移栽，得到再生植株。本发明采用千层金无菌苗幼嫩叶片为外植体，间接诱导不定芽发生，完善了千层金不定芽诱导再生体系。通过上述研究，建立了高效的千层金离体叶片再生体系，为建立千层金高效遗传转化体系奠定基础，同时也为今后选育千层金优良品种提供技术参考。

主权项

一种千层金再生体系建立的方法，包括下列步骤：（1）将外植体千层金无菌苗幼嫩叶片从叶柄处切下，接种到含有激素的MS愈伤组织诱导培养基中，培养12‑15天；（2）再在含有激素的MS愈伤组织继代培养基中培养25‑30天；（3）将愈伤组织接种至含有激素的MS分化培养基上进行分化培养；（4）待不定芽长至2‑3cm时，将其切下，接种至MS培养基里进行壮苗培养；（5）待不定芽长至4‑5cm时，将其接种至含有激素的MS生根培养基上进行生根培养；（6）待不定芽根系长出后，将其炼苗移栽。所述愈伤组织诱导培养基中的激素为0.01～0.03mg/L的噻重氮苯基脲和0.05～0.1mg/L的萘乙酸，或者0.5～1.5mg/L的6‑苄氨基嘌呤和0.05～0.1mg/L的萘乙酸；所述愈伤组织继代培养基中的激素为0.01～0.03mg/L的噻重氮苯基脲和0.05～0.1mg/L的萘乙酸，或者0.5～1.5mg/L的6‑苄氨基嘌呤和0.05～0.1mg/L的萘乙酸；所述分化培养基中的激素为0.01～0.03mg/L的噻重氮苯基脲和0.05～0.1mg/L的萘乙酸，或者0.5～1.5mg/L的6‑苄氨基嘌呤和0.05～0.1mg/L的萘乙酸；所述生根培养基中的激素为0.1～1.0mg/L的吲哚丁酸。