发明名称 |
体外诱导生成含L-ASPase II的红细胞药物的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种体外诱导生成含L-ASPase II的红细胞药物的方法,包括以下步骤:1)使用慢病毒载体系统改造诱导性多能干细胞:Ⅰ.构建pLenti6.3/V5-GW/Em-GFP VerA-L-ASPase II质粒;Ⅱ.使用293T细胞包装生成高滴度的含L-ASPase II的病毒颗粒;Ⅲ.使用病毒颗粒转染诱导性多能干细胞;2)体外诱导诱导性多能干细胞生成含L-ASPase II的红细胞:Ⅰ.IPS细胞体外分化诱导成红细胞体EB;Ⅱ.EB诱导分化成成熟红细胞。本发明通过对IPS细胞使用慢病毒载体系统进行基因改造,并将之在体外诱导生成含有L-ASPase II的红细胞,生成的红细胞既能够作为L-ASPase II的缓释载体使用,又能够保持红细胞原有的形态功能,进一步降低了L-ASPase II的毒副作用,为今后的临床应用打下坚实的基础。 |
申请公布号 |
CN103224957A |
申请公布日期 |
2013.07.31 |
申请号 |
CN201310132901.1 |
申请日期 |
2013.04.16 |
申请人 |
叶永清 |
发明人 |
叶永清 |
分类号 |
C12N15/867(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;A61K38/50(2006.01)I;A61K47/46(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61P35/02(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/867(2006.01)I |
代理机构 |
|
代理人 |
|
主权项 |
体外诱导生成含L‑ASPase II的红细胞药物的方法,其特征在于:包括以下步骤:1)使用慢病毒载体系统改造诱导性多能干细胞:Ⅰ.构建pLenti6.3/V5‑GW/Em‑GFP VerA‑L‑ASPase II质粒;Ⅱ.使用293T细胞包装生成高滴度的含L‑ASPase II的病毒颗粒;Ⅲ.使用病毒颗粒转染诱导性多能干细胞;2)体外诱导诱导性多能干细胞生成含L‑ASPase II的红细胞:Ⅰ.IPS细胞体外分化诱导成红细胞体EB;Ⅱ.EB诱导分化成成熟红细胞。 |
地址 |
350001 福建省福州市华林路338号福城花园2号楼13楼71D |