人干细胞自我更新支持因子（hSDNSF）的体外重组表达技术

摘要

本发明提供人干细胞自我更新支持因子(hSDNSF)体外重组表达技术，属于生物医学技术领域。本发明以原核表达常用质粒pET32a＋为载体，将带有甲酸切割位点的hSDNSF目的基因克隆到载体上，热激法转入原核表达菌株大肠杆菌BL21（DE3）中，挑取阳性克隆用于大量表达融合了hSDNSF的重组蛋白，后经甲酸切割，SDS-PAGE及质谱验证分子量，确认得到了hSDNSF纯品。利用流式细胞仪检测出表达的蛋白具有干细胞自我更新支持的功能，从而表明体外重组表达技术能够获得有活性的hSDNSF，为其后续在干细胞自我更新及肿瘤发生发展中的作用的研究提供了必要的样品来源。

主权项

人干细胞自我更新支持因子（hSDNSF）的体外重组表达技术，其特征在于该技术以原核表达常用质粒pET32a＋为载体，将带有甲酸切割位点的hSDNSF目的基因克隆到载体上，热激法转入原核表达菌株大肠杆菌BL21（DE3）中，挑取阳性克隆用于大量表达融合了hSDNSF的重组蛋白，后经甲酸切割，SDS‑PAGE及质谱验证分子量，确认得到了hSDNSF纯品；利用流式细胞仪检测出表达的蛋白具有干细胞自我更新支持的功能，从而表明体外重组表达技术能够获得为其后续研究工作提供量的保证的有活性的hSDNSF。