蛋白酶检测

摘要

含有发色氨基酸的多肽。发色氨基酸在其N和C端两侧具有至少一个氨基酸。发色氨基酸的氨基具有至少为5的pKa。发色氨基酸能够与共轭醛反应。多肽含有靶蛋白酶的靶序列，该靶蛋白酶能够切开含有发色氨基酸的氨基的肽键。

主权项

在样品中检测蛋白酶的方法，包括下列步骤：(i)将样品暴露于含有发色氨基酸的多肽，其中发色氨基酸在其N和C端两侧连有至少一个氨基酸，发色氨基酸的胺基具有低于5的pKa，发色氨基酸能够与共轭醛反应，并且其中多肽包含靶蛋白酶的靶序列，该靶蛋白酶能够切开包含发色氨基酸的氨基的肽键；以及允许蛋白酶切开多肽并产生片段，在该片段的N‑末端显示发色氨基酸；(ii)将共轭醛与含有发色氨基酸的片段反应，产生有色加成物；以及(iii)检测有色加成物，有色加成物的存在表明样品中存在蛋白酶，其中发色氨基酸与天然氨基酸等排性匹配。