用FQ-PCR检测嗜水气单胞菌的方法

摘要

本发明提供的用FQ-PCR检测嗜水气单胞菌的试剂盒，所说试剂盒中所包装的试剂中，上、下游引物及TaqMan探针有甲乙两组中的一组或两组。与现有技术相比，由于所针对的因子是有毒力的嗜水气单胞菌株所特有的，因此可准确地检定试样中是否存在有毒力的嗜水气单胞菌株，从而提高疾病预警的准确性。同时，应用所说甲级或乙组试剂检测出模板中含有溶血素基因（hlyA）或丝氨酸蛋白酶基因（ahpA），则表明其含有一定致病性，而应用两组试剂检测出模板中含有溶血素基因（hlyA）和丝氨酸蛋白酶基因（ahpA），则表明其含有较高致病性。

主权项

一种用FQ‑PCR检测嗜水气单胞菌的试剂盒，其特征是试剂盒所装试剂中有：①2x Premix EX Taq反应液：由Taq 酶、buffer、dNTP Mixture、Mg2+混合而成；②上游引物；③下游引物；④TaqMan探针；所说上游引物、下游引物及TaqMan探针有甲乙两组中的一组或两组，其中：甲组上游引物的DNA序列为5’‑ACC GCA AGA TCA ACG ATA CCG AGT‑3’，甲组下游引物的DNA序列为5’‑ATC CAG CGA GAT CCG CAC TAT CTT‑3’，甲组TaqMan探针的DNA序列为5’‑（FAM）‑AAC ATC TCG CTG GTT TAC CGG GTC AA‑（TAMRA）‑3’；乙组上游引物的DNA序列为5’‑ACC CAG GAC GGT GCG ATA TAA GAT‑3’，下游引物的DNA序列为5’‑TCT CAC TTG CCT GAA CTG AAG CGA ‑3’，TaqMan探针的DNA序列为5’‑（FAM）‑AAC ATC GTT AGC GTT GGC AAT CTC GG‑（TAMRA）‑3’。