发明名称 |
基于Taqman探针的水产品中麦氏弧菌的荧光定量PCR快速检测方法 |
摘要 |
本发明公开了一种基于Taqman探针的麦氏弧菌(Vibriometschnikovii)的荧光定量PCR快速检测方法,采用麦氏弧菌特异性引物和TaqMan探针,即可对水产品中麦氏弧菌进行检测与监控 。其中上游引物Vmetschnikovii-1:5'-GCTATTCGAAAGTTTATTCTTC-3',下游引物Vmetschnikovii-2:5'-CCAAGATGGTCGATATCATC-3',特异性TaqMan探针为:Vmetschnikovii-3:5'-CGTAGGTCGTATGAAGTTCAATAGT-3'。检测麦氏弧菌的方法包括细菌基因组DNA的提取、麦氏弧菌的荧光定量PCR检测。其优点是快速、特异性强、灵敏度高。另外,本发明与普通PCR技术相比,不需要凝胶电泳拍照观察,实现了检测流程一体化封闭检测,避免了PCR产物对实验室的污染。 |
申请公布号 |
CN103215347A |
申请公布日期 |
2013.07.24 |
申请号 |
CN201310076856.2 |
申请日期 |
2013.03.12 |
申请人 |
山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
发明人 |
贾俊涛;吴振兴;李正义;祝素珍;姜英辉;马云;张健 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12R1/63(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种基于Taqman探针的快速检测水产品中麦氏弧菌的荧光定量PCR方法,其特征在于首先提取TCBS平板上的可疑菌落的基因组DNA并稀释备用;再利用麦氏弧菌保守性强的基因组DNA序列设计特异性引物和探针;最后使用该引物和探针对待测水产品TCBS平板上可疑菌落的基因组DNA进行荧光定量PCR扩增和荧光信号的检测;其中所述的麦氏弧菌特异性引物为:上游引物Vmetschnikovii ‑1:5'‑ GCTATTCGAAAGTTTATTCTTC ‑3';下游引物Vmetschnikovii ‑2:5'‑ CCAAGATGGTCGATATCATC ‑3';特异性TaqMan探针为:Vmetschnikovii‑3:5'‑ CGTAGGTCGTATGAAGTTCAATAGT‑3'。 |
地址 |
266002 山东省青岛市市南区瞿塘峡路70号 |