猪繁殖与呼吸综合症和猪乙型脑炎双重一步法RT-PCR诊断试剂盒

摘要

本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合症和猪乙型脑炎双重一步法RT-PCR诊断试剂盒，包括100µL DL2000、20µL RT-PCR一步法酶、250µL酶缓冲液、300µL RNase Free dH2O、80µL混合引物（浓度各为10μmol/L）、20µL阳性对照及20µL阴性对照。本发明根据GenBank中的猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）ORF7 N基因、猪乙型脑炎病毒（JEV）NS1基因序列，设计了2对引物，通过反应条件的优化，成功研制了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪乙型脑炎病毒的双重一步法RT-PCR诊断试剂盒，它对这两种病毒具有敏感性、特异性。可用于临床猪繁殖与呼吸综合征和猪乙型脑炎的检测。

主权项

一种猪繁殖与呼吸综合症和猪乙型脑炎双重一步法RT‑PCR诊断试剂盒，其特征在于：包括100µL DL2000、20µL RT‑PCR一步法酶、250µL 酶缓冲液、300µLRNase Free dH2O、80µL混合引物，各引物的浓度均为10μmol/L、20 µL阳性对照及 20µL阴性对照；混合引物包括PRRSV 上游引物、PRRSV 下游引物、JEV上游引物及JEV下游引物；PRRSV 上游引物的序列为：5’ –CGCCCAACAAAACCAGTCCAGA–3’，PRRSV 下游引物的序列为：5’–CAGTATATTGCTCGGCAAACT–3’；JEV上游引物的序列为：5’ –TCCTCGTCATAGGGATTTGCT–3’，JEV下游引物的序列为：5’ –AGGCCCAAGGCGTGAGGGCGG–3’。