一种SBR中活性污泥样品DNA的提取方法

摘要

本发明涉及一种SBR中活性污泥样品DNA的提取方法,包括：污泥样品前处理、破碎、蛋白质的去除、DNA的分离提纯、基因组DNA纯化、DNA的紫外分光光度分析、DNA琼脂糖凝胶电泳检测。本发明具有快速，高效的特点，可以高效提取印染废水或相同的水质情况废水的活性污泥基因组DNA，具有良好的应用前景。

主权项

一种SBR中活性污泥样品DNA的提取方法，包括：（1）活性污泥样样品在处理前首先混匀，采用TENP、PBS溶液和玻璃珠震荡法对样品进行预处理；将经预处理的污泥样品采用冻融法破碎，冷藏、沸水煮，再加入质量百分比浓度2%～10%的SDS缓冲液去除蛋白质；（2）加入0.6倍样品体积的异丙醇，颠倒混匀，进行沉淀；离心，倒掉上清液；自然风干，用TE缓冲液悬浮样品，溶解沉淀，即得基因组DNA粗提液；加入RNase A，35～40℃温浴15‑20min消化RNA，然后采用DNA胶回收试剂盒，按照操作说明进行纯化；（3）用紫外分光光度计测定上述纯化DNA样品在波长230、260、280nm处的吸光光度值；将上述纯化DNA样品进行琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色后，用紫外凝胶成像系统拍照。