用于同时检测副溶血弧菌和溶藻弧菌的多重PCR引物及其设计方法

摘要

本发明涉及一种扩增副溶血弧菌和溶藻弧菌的多重PCR引物及其设计方法，设计方法包括以下步骤：步骤1，利用引物设计软件设计一系列同时扩增副溶血弧菌和溶藻弧菌的多重PCR引物组合；步骤2，对一系列引物对进行筛选，选择扩增效果最佳的引物组合；步骤3，对选择好的最佳引物组合进行反应条件摸索；步骤4，对建立的方法进行特异性、重复性和稳定性等摸索。本发明解决副溶血弧菌和溶藻弧菌检测过程中常规细菌分离检测周期长的问题，而且同时检测两种菌，具有快速、特异、敏感、节约费用等优点。

主权项

用于同时检测副溶血弧菌(V.para.)和溶藻弧菌(V.algi.)的多重PCR引物，其特征在于：副溶血弧菌引物对应的PCR扩增片段大小为208 bp，溶藻弧菌引物对应的PCR扩增片段大小为159 bp，具体引物序列如下：V.para.（ToxR）F1：5’‑ CGAAAGCCGTATACTCCTGATG ‑3’V.para.（ToxR）R1：5’‑ GAGTTGATAGCCTCGTTTTGGA ‑3’V.algi.（ToxR）F1：5’‑ GATCGTTTTGACCTGCGAAA ‑3’V.algi.（ToxR）R1：5’‑ GCATTGAGCGCTACGTGAA ‑3’。