金针菇产漆酶的发酵条件

摘要

本发明所属微生物发酵技术领域。本发明涉及金针菇金杂9产漆酶的发酵条件。将保存的金针菇金杂9原种转接于PDA斜面培养基，28℃恒温培养7天，再转接到PDA平板上，28℃恒温培养7天，至菌丝长满平板；培养的菌丝用打孔器制成直径10毫米的菌片，接种4片菌片到装有50毫升发酵培养基的250毫升三角瓶中进行发酵培养。培养条件是：温度28℃，180r/min摇瓶培养7天，发酵培养基的pH是5.5；金针菇金杂9产漆酶的发酵培养基为(克/升)：葡萄糖20，尿素2，KH2PO3.0，MgSO 1.5，ZnSO 0.05，MnSO 0.05。发酵培养基内含60微摩尔/升铜离子和10微摩尔/升二甲氧基苯甲酸。

主权项

本发明涉及金针菇产漆酶条件的优化，其特征在金针菇产漆酶条件的优化方法，包括以下过程：步骤(一)：将保存的金针菇原种转接于PDA斜面培养基复活，28℃恒温培养6～8d天，4℃保存；步骤(二)：取步骤(一)保存的菌种接到PDA平板上，28℃恒温培养6～8天，至菌丝长满平板；步骤(三)：步骤(二)培养的菌丝用打孔器制成直径10毫米的菌片，接种4片菌片到装有50毫升发酵培养基(内含60微摩尔/升铜离子和10微摩尔/升二甲氧基苯甲酸)的250毫升三角瓶中，28℃，180r/min摇瓶培养7天；步骤(四)：步骤(三)发酵后的发酵液在4000r/min离心15分钟，上清液即为粗酶液；步骤(五)：步骤(四)中的粗酶液以邻联甲苯胺为底物，在醋酸缓冲体系下测定其酶活，以每分钟光密度增加0.01为一个酶活力单位(U/mL)。