一种耐高温耐乙醇生香酵母的驯化方法

摘要

本发明涉及生物工程技术领域，提供了一种耐高温耐乙醇生香酵母的驯化方法。本发明步骤为：（1）从市售的生香酵母中筛选得到生香优良的酵母菌株；（2）将对数期生香酵母菌液与海藻酸钠水溶液在室温无菌状态下混合均匀，再将混合液加入到氯化钙水溶液中制备成凝胶球颗粒，然后在2-4℃下固化4-5小时得固定化凝胶颗粒；（3）对固定化生香酵母在乙醇驯化培养基中进行耐高温耐乙醇的循环梯度驯化，循环驯化多次，最后得到耐高温耐乙醇的生香酵母。本发明选用循环梯度驯化法，操作简单、方便，可以筛选出耐高温耐乙醇的酵母菌株，解决了芝兰香型白酒生产中生香酵母的耐高温、耐乙醇性能差的缺陷，提高了发酵能力。

主权项

一种耐高温耐乙醇生香酵母的驯化方法，其特征在于：所述的驯化方法步骤如下：（1）、以总酯含量和闻香为指标，同时兼顾酒精度，从市售的生香酵母中筛选得到生香优良的酵母菌株；（2）、将步骤（1）筛选得到生香优良的酵母菌株接入麦芽汁培养基中培养至对数期，获得对数期生香酵母菌液，将对数期生香酵母菌液与海藻酸钠水溶液在室温无菌状态下混合均匀，再将混合液加入到氯化钙水溶液中制备成凝胶球颗粒，然后在2‑4℃下固化4‑5小时得固定化凝胶颗粒，用无菌水将固定化凝胶颗粒水洗后获得固定化生香酵母；（3）、对固定化生香酵母在乙醇驯化培养基中进行耐高温耐乙醇的循环梯度驯化，具体设置参数为：循环梯度驯化的乙醇驯化培养基中乙醇体积百分比浓度范围为：最低浓度为1%‑5%，最高浓度为10%‑15%；循环梯度驯化的温度范围为：最低温度为28‑32 ℃，最高温度为40‑45 ℃；每个梯度采用乙醇体积百分比浓度的梯度增幅1%‑3%及采用温度梯度增幅0.5℃‑3℃；循环驯化多次，最后得到耐高温耐乙醇的生香酵母。