发明名称 一种绣球菌抗肿瘤免疫活性的检测方法
摘要 本发明提供了一种绣球菌抗肿瘤免疫活性检测方法,用于标示和区分绣球菌产品,使其生物活性直观通俗地表达出来,便于人们选用此类产品。本发明检测方法通过用绣球菌刺激单核细胞株THP-1细胞后所产生细胞因子INF-γ的表达量,与ConA诱导产生的INF-γ的表达量比较,用相应ConA的浓度评价绣球菌的生物活性,标示为ACIF值,直观标示绣球菌产品的生物活性。
申请公布号 CN103197065A 申请公布日期 2013.07.10
申请号 CN201310139032.5 申请日期 2013.04.18
申请人 上海科爱生物技术有限公司 发明人 吕正兵;董淮海;叶甫云
分类号 G01N33/569(2006.01)I 主分类号 G01N33/569(2006.01)I
代理机构 上海衡方知识产权代理有限公司 31234 代理人 卞孜真
主权项 一种绣球菌抗肿瘤免疫活性的检测方法,其特征在于包括以下工艺步骤:1)取绣球菌葡聚糖蛋白复合体(SGP)样品,配制成溶液;2)取THP‑1细胞,调整细胞密度至105~106个/ml;3)向步骤2)中培养得到的细胞中加入步骤1)的SGP溶液至终浓度达到10μg~2.0mg/ml,然后进行培养;4)取步骤3)得到的培养物离心后收集细胞上清液;5)取步骤4)得到的细胞上清液用ELASA法检测IFN‑γ浓度,在SGP作用浓度为10μg~2.0mg/ml范围内,IFN‑γ浓度与SGP浓度具有明显的正相关。6)取ConA,按上述步骤检测IFN‑γ浓度,控制ConA终浓度为1‑3μg/ml,用ConA浓度值的10倍,作为抗肿瘤免疫活性因子水平(Anticancer Immune Factor,ACIF)值。
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