由全保护核苷磷酰胺中间体通过酸催化合成核苷三磷酸和核苷二磷酸的方法

摘要

一种由全保护核苷磷酰胺中间体通过酸催化合成核苷三磷酸和核苷二磷酸的方法，以苄氧羰基保护核苷为原料，与苄氧基二异丙基氨基亚磷酰氯在碱性条件下生成亚磷酰胺中间体粗品；再经弱酸催化水解得到核苷-氢亚磷酸二酯中间体粗品；核苷-氢亚磷酸二酯中间体粗品，与烷基胺进行氧化偶联，柱层析得到全保护核苷磷酰胺前体；再在N,N-二甲基甲酰胺溶液中经催化、氢化脱除全部保护基，之后过滤除去钯碳；与焦磷酸或单磷酸烷基铵盐在弱酸性催化剂存在的条件下反应得到核苷二磷酸和核苷三磷酸产物。本发明大幅度地提高了焦磷酸和单磷酸试剂与核苷磷酰胺中间体的反应速度和产率，为核苷5′-三磷酸和核苷5′-二磷酸的化学合成建立了一种高效和通用的新方法。

主权项

一种由全保护核苷磷酰胺中间体通过酸催化合成核苷三磷酸和核苷二磷酸的方法，其特征在于：它包括以下步骤： 全保护核苷磷酰胺中间体的合成方法：（a）、以苄氧羰基保护核苷为原料，与苄氧基二异丙基氨基亚磷酰氯在碱性条件下生成亚磷酰胺中间体粗品；（b）、亚磷酰胺中间体粗品再经弱酸催化水解得到核苷‑氢亚磷酸二酯中间体粗品；（c）、核苷‑氢亚磷酸二酯中间体粗品，最后与烷基胺进行氧化偶联，柱层析得到全保护核苷磷酰胺前体；核苷二磷酸和核苷三磷酸的酸催化合成方法：（d）、全保护核苷磷酰胺在N,N‑二甲基甲酰胺溶液中经催化、氢化脱除全部保护基，之后过滤除去钯碳；（e）、再与焦磷酸或单磷酸烷基铵盐在弱酸性催化剂存在的条件下反应得到核苷二磷酸和核苷三磷酸产物；（f）、上述步骤的粗产物经过乙醇沉淀，离子交换凝胶色谱或反相C18 HPLC纯化，以及最终的离子交换得到18种高纯度核苷二磷酸和核苷三磷酸。