用乙肝病毒核心颗粒展示抗原表位的载体、动物疫苗及其制备方法

摘要

本发明涉及一种用乙肝病毒核心颗粒展示抗原表位的载体、动物疫苗及其制备方法，其采用人工合成DNA的方法，合成乙肝病毒核心蛋白必要的氨基酸的编码DNA序列。在合成过程中，使用乙肝病毒核心蛋白质真肽1-149位氨基酸的编码DNA序列为骨架，去掉了骨架中第79-82位氨基酸的编码序列，只保留与组装病毒颗粒有关的编码DNA；为便利乙肝病毒核心颗粒蛋白中插入其它抗原蛋白，特别在第79-82位氨基酸的部位插入一段编码柔性肽的DNA序列，并在该序列中引入三个内切酶位点，便于基因操作；将上述合成DNA片段克隆到基因克隆载体pUC18中，形成用来展示抗原表位的专门载体pZNVC。在pZNVC插入一个抗原蛋白基因或编码表位的合成DNA片段，并在原核或真核生物中表达出融合蛋白，乙肝病毒N端的78个氨基酸和C端的68个氨基酸将折叠成两个柱状体，形成组装核心蛋白颗粒的“砌块”；柔性肽将形成连接两个柱状体的纽带，而插在柔性肽中间的蛋白质将突起在病毒颗粒的表面。柔性肽是由不带侧链的一串小氨基酸组成，具有柔韧性，不干扰乙肝病毒核心颗粒蛋白和抗原蛋白各自独自折叠成其天然分子构型。使用pZNVC来展示抗原蛋白抗原表位，可以最大限度地模拟它们在天然病原体外膜上的存在状况。

主权项

一种用乙肝病毒核心颗粒展示抗原表位的载体，其特征在于：所述载体由基因克隆载体pUC18以及克隆到pUC18载体上的一个DNA片段组成，所述DNA片段的基因序列如SEQ ID NO：1。