一种利用啤酒废酵母制备甘露寡糖的方法

摘要

本专利公开了一种利用啤酒废酵母制备甘露寡糖的方法，涉及饲料添加剂技术领域。针对现有的以β-甘露聚糖酶水解植物多糖制备甘露寡糖，生产成本高的问题。本发明的制备方法步骤如下：（1）由啤酒废酵母制得酵母细胞壁液体或固体；（2）制备异甘露聚糖酶粗酶液；（3）将经步骤（2）制得的异甘露聚糖酶粗酶液加入经步骤（1）制得的酵母细胞壁液体或固体中水解制备甘露寡糖。本发明的方法用于生产可作畜禽及水产饲料添加剂的甘露寡糖。

主权项

一种利用啤酒废酵母制备甘露寡糖的方法，包括如下步骤：（1）由啤酒废酵母制得酵母细胞壁液体或固体；具体处理方法包括：啤酒废酵母预处理、制备酵母细胞壁液体和制备酵母细胞壁固体三步骤；其中：(a)所述的啤酒废酵母预处理：是将啤酒废酵母从发酵罐中取出后用自来水洗涤，水温不超过10°C，以防止酵母自溶，对洗涤后的废酵母进行离心分离得到酵母泥，离心机转速3000r/min，离心分离时间为30min，处理好的酵母泥为灰白色奶油状，低温保存；(b)所述的制备酵母细胞壁液体：是将质量浓度为50g/L～150g/L的酵母泥、质量浓度为400g/L～500g/L的醋酸‑醋酸钠缓冲液和蒸馏水混合，将制得的混合液置入密封容器中，搅匀后静止0.5h～1h，并在温度30°C～80°C下，水浴加热12h～48h；酵母泥、醋酸‑醋酸钠缓冲液和蒸馏水三种物料按1:3.5:4.5体积配比组成，所述的醋酸‑醋酸钠缓冲液由质量浓度分别为2.4g/L的醋酸、109.2g/L的醋酸钠、20g/L的氯化钠和1L蒸馏水混合制得，所述醋酸‑醋酸钠缓冲液的pH值为6；(c）所述的制备酵母细胞壁固体：是将经步骤（b）制得的酵母细胞壁液体进行离心分离，弃上清液，将沉淀部分在温度40°C～80°C下干燥12h～48h，制得酵母细胞壁固体;（2）制备异甘露聚糖酶粗酶液；所述制备异甘露聚糖酶粗酶液的步骤如下：（a）制备种子培养基溶液和发酵培养基溶液；按如下原料制备种子培养基溶液：酵母细胞壁0.5g～20g、蛋白胨1g～40g、氯化钠0.5g～20g、水1000ml，种子培养基溶液pH值为5.0～8.0；按如下原料制备发酵培养基溶液：酵母细胞壁0.5g～20g、蛋白胨1g～40g、氯化钠0.5g～20g、水1000ml，发酵培养基溶液pH值为5.0～8.0；（b）发酵液的制备：将枯草芽孢杆菌菌株接种到经步骤（a）制得的种子培养基中，在温度25°C～45°C下培养12h～72h，按质量浓度为10g/L～200g/L 的接种量接种到经步骤（a）制得的发酵培养基培养，振荡器中温度为25°C～45°C、振荡频率为100r/min～250r/min，振荡培养时间为12h～72h，制得发酵液；（c）异甘露聚糖酶粗酶液的制备：对经步骤（b）制得的发酵液进行离心分离，低温下离心机转速为4000r/min～13000r/min，离心时间为5min～20min，取上清液制得异甘露聚糖酶粗酶液;（3）将经步骤（2）制得的异甘露聚糖酶粗酶液加入经步骤（1）制得的酵母细胞壁液体或固体中,进行水解制备甘露寡糖；甘露寡糖的具体制备步骤如下：取质量浓度为200g/L～700g/L的异甘露聚糖酶粗酶液加入质量浓度为10g/L～200g/L的酵母细胞壁液体制得混合液，所述混合液pH值为5～8，水解温度为30°C～80°C，水解时间为2h～10h，水浴加热所述混合液至粘稠状，在30°C～100°C下烘干至恒重，粉碎制得甘露寡糖粉末。