一种抗肿瘤小肽FpAT的制备方法

摘要

本发明涉及一种抗肿瘤小肽FpAT的制备方法，技术方案包括如下步骤：采取Fmoc/tBu固相多肽合成策略，以2-氯三苯甲基氯树脂(CTC Resin)作载体，制备替代度为0.4～0.7mmol/g的Fmoc-Arg(Pbf)-CTC Resin；通过固相多肽合成方法，从FpAT的C端到N端的序列依次缩合Fmoc保护氨基酸，直至N末端的天冬氨酸缩合完成后，得到FpAT的全保护肽树脂；用TFA/苯甲硫醚/EDT/苯甲醚做裂解试剂，无水乙醚沉降，获得FpAT粗肽；将FpAT粗肽加水溶解，调节pH至3～4，使用制备型反相HPLC纯化，收集纯度合格的目的产物，冻干得到成品。此工艺操作简便，生产效率较高，对设备要求低，总收率可达到35％以上，可以规模化生产，有较好的经济社会价值和应用前景。

主权项

FpAT小肽的制备方法，所述FpAT的氨基酸序列为H‑Asp‑Ser‑Gly‑Glu‑Gly‑Asp‑Phe‑Leu‑Ala‑Glu‑Gly‑Gly‑Gly‑Val‑Arg‑OH，其特征在于包括如下步骤：(1)将Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH连接到载体2‑氯三苯甲基氯树脂上获得Fmoc‑Arg(Pbf)‑CTC树脂；(2)按照Fmoc/tBu固相多肽合成方法，根据FpAT的序列，从C端到N端逐步偶联Fmoc保护氨基酸，直至完成FpAT肽树脂的合成；(3)使用裂解试剂将FpAT从树脂载体上切下，离心、干燥得到粗肽；(4)将步骤3所得的粗肽加纯水溶解，调pH，利用制备型反相HPLC纯化，收集目的产物，旋蒸，冻干得到FpAT成品。