一种抑制聚合酶链式反应试剂盒

摘要

本发明涉及一种操作简单、特异性高的DNA体外扩增技术即抑制聚合酶链反应检测试剂盒，其英文名称是suppression polymerase chain reaction，英文缩写是S-PCR，首先根据待扩增靶DNA序列合成一对特殊的抑制引物，该引物的3’端约15～18个碱基与模板DNA序列互补，其5’端11～14个碱基则与其自身序列形成反向互补；然后溶解引物使引物形成部分双链结构；最后将抑制引物加入含有耐热DNA聚合酶、dNTPs、模板DNA、镁离子、PCR缓冲液、超纯水等组成的PCR扩增缓冲反应体系中，在热循环仪上进行高温、低温、中温的反复热循环；在扩增的过程中，当温度降低到退火温度时，除了与模板特异结合外，还会有大量的抑制引物自身复性成双链引物，由于链内复性的优先性，则会使大部分非特异性扩增的单链两端复性产生发夹结构，失去成为有效PCR模板的活性，因而提高了扩增的特异性。

主权项

一种扩增脆性X智力低下1号基因的5’非翻译区序列的引物对，其序列为：上游抑制引物P1：5’‑CCA CCG GAA GGT GAT CAC CTT CCG GTG GAG‑3’下游抑制引物P2：5’‑GGC TGAAGA GAA GCT TCT CTT CAG CCC TG‑3’。