峨眉拟单性木兰组织培养方法

摘要

本发明属于农林苗木组织培养技术领域，具体是一种峨眉拟单性木兰组织培养方法。该方法是将峨眉拟单性木嫩枝经消毒，以普通茎尖进行诱导、增殖和生根培养，得到再生苗。本发明的优点在于以取材方便的植株为母本，普通茎尖为外植体材料；完善了灭毒处理方法；解决了目前有性繁殖中存在的种子难以有效获取的问题，成功建立了峨眉拟单性木兰的组织培养体系，挽救了我国濒危植物峨眉拟单性木兰。

主权项

一种峨眉拟单性木兰组织培养方法，其特征在于该方法包括下列步骤: 1）外植体处理：取峨眉拟单性木兰嫩枝，清洗后，在无菌条件下，用质量浓度70%的酒精消毒30s，质量浓度0.01% 的HgCl2 溶液灭毒10‑15 min，用无菌水冲洗5‑6 次；2）诱导培养：将经灭毒的嫩枝，取1cm长茎尖作外植体，接种于诱导培养基，培养温度27±2°C，光照12h，光照强度2000Lx，培养40‑45天即可长成3 cm 左右的嫩梢；3）分化培养：从诱导培养基上剪切已萌动的嫩梢，转入分化培养基，培养温度27±2°C，光照12h，光照强度2000Lx，20天每个接种的嫩梢可分化出大于0.5 cm的有效不定芽达4个左右，培养时间为45天；4）生根培养：从分化培养基上剪下长高至3‑4 cm的试管苗嫩梢，转入生根培养基，培养温度27±2°C，光照12h，光照强度2000Lx，培养时间为20天，生根率达80%以上；5）炼苗培养：将组培苗瓶移至室外，自然光下封口炼苗10‑15天，取出组培苗将根部的琼脂洗净，移栽到经过0.2% 的高锰酸钾消毒的蛭石中，浇透水，用塑料膜保湿，置于23‑30°C的温室中生长，半个月后将苗栽于营养钵中，于遮光50%的阴棚下放置30天，即可进行常规管理。