一种重组尿酸氧化酶的高效分泌表达及纯化方法

摘要

一种重组尿酸氧化酶的高效分泌表达及纯化方法，属于医药生物工程领域。技术方案包括：由大肠杆菌碱性磷酸酶启动子、大肠杆菌LamB信号肽的编码序列的人工合成的重组尿酸氧化酶的编码序列表达重组尿酸氧化酶的大肠杆菌操纵子；将上述操纵子克隆至携大肠杆菌质粒载体pBR322中获得的表达质粒；利用含有上述大肠杆菌操纵子的表达质粒转化W3110大肠杆菌空宿主得到的分泌表达重组尿酸氧化酶的工程菌；经阳离子层析、疏水层析、阴离子层析的重组尿酸氧化酶的纯化工艺。本发明的有益效果是用大肠杆菌碱性磷酸酶启动子对蛋白表达的调控,用优化的大肠杆菌LamB信号肽引导尿酸氧化酶分泌表达，有良好的分泌表达效果。纯化方法简单易行，蛋白质纯化周期短，蛋白质收率高。

主权项

一种表达重组尿酸氧化酶的大肠杆菌操纵子，其结构包括：大肠杆菌碱性磷酸酶启动子（SEQ1）、经过优化改造的LamB信号肽的编码序列（SEQ2）、人工合成的重组尿酸氧化酶的编码序列（SEQ3）。