以产甘油假丝酵母特征5.8S序列为整合位点的pURGAP载体构建及其应用

摘要

本发明公开了一种能用同源重组来克隆的产甘油假丝酵母整合载体pURGAP的构建及其应用。所构建的pURGAP载体包含有酵母Candida glycerinogenes的通过构建带有5.8S rDNA序列SEQ NO.2，可整合于酵母Candida glycerinogenes特征5.8S序列SEQ NO.1位点，所构建的pURGAP载体还包含有渗透压启动子PCgGAP、zeocin抗性标记和在大肠杆菌高拷贝的所有元件。与其它整合载体相比，pURGAP以特征5.8S rDNA序列为整合位点可显著提高整合载体转化效率，并明显增强外源蛋白表达强度。所构建的pURGAP可有效地将外源基因或启动子在产甘油假丝酵母中进行整合表达，是提高表达载体的整合效率，加速工业菌株产甘油假丝酵母重组改造速度的一种重要方法。

主权项

一种重组表达载体pURGAP的构建，其特征在于一种能利用同源重组表达外源基因的产甘油假丝酵母整合载体如附图1所示。