一种检测虫媒脑炎病毒的新技术

摘要

本发明涉及一种能够检测常见虫媒脑炎病毒的方法。本发明还涉及用于检测常见虫媒脑炎病毒的扩增引物和延伸引物，以及包含这些引物的试剂盒。

主权项

对样品中的虫媒脑炎病毒进行非诊断目的检测的方法，其包括以下步骤：1）使用扩增引物对PCR扩增样品的cDNA，从而获得扩增产物，所述扩增引物对针对的是每种待检测病毒基因组序列的保守区；2）以步骤1）中获得的扩增产物为模板，使用延伸引物通过延伸反应获得延伸产物，所述延伸引物针对的是扩增引物所扩增序列中相对保守的区域；3）对所述延伸产物进行质谱检测确定样品的谱峰，通过将所述谱峰与延伸引物分子量及对应延伸产物分子量信息比对确定待检测的脑炎病毒的具体类型，其中所述扩增引物和所述延伸引物为扩增引物对SEQ ID NO:1和2与延伸引物SEQ ID NO:17组合、扩增引物对SEQ ID NO:3和4与延伸引物SEQ ID NO:18组合、扩增引物对SEQ ID NO:5和6与延伸引物SEQ ID NO:19组合、扩增引物对SEQ ID NO:7和8与延伸引物SEQ ID NO:20组合、扩增引物对SEQ ID NO:9和10与延伸引物SEQ ID NO:21组合、扩增引物对SEQ ID NO:11和12与延伸引物SEQ ID NO:22组合、扩增引物对SEQ ID NO:13和14与延伸引物SEQ ID NO:23组合以及扩增引物对SEQ ID NO:15和16与延伸引物SEQ ID NO:24组合中一组或多组，其中所述虫媒脑炎病毒选自日本脑炎病毒、西方马脑炎病毒、东方马脑炎病毒、西尼罗病毒、委内瑞拉马脑炎病毒、狂犬病毒、圣路易脑炎病毒和蜱传脑炎病毒中的一种或多种。