| 摘要 |
1. Вектор с повышенной сегрегационной стабильностью для высокоэффективной экспрессии рекомбинантных белков, в следующей последовательности содержащий:- участок инициации репликации pBR322 ori;- ген репрессора лактозного оперона;- промотор;- область, кодирующую N-концевой лидерный пептид, содержащую декагистидиновый кластер и, необязательно, сайт узнавания протеинкиназой;- участок клонирования (полилинкер);- участок терминации транскрипции;- фрагмент, кодирующий негеномную пару токсин-антитоксин и обеспечивающий сегрегационную стабильность; и- ген, кодирующий маркер селекции.2. Вектор по п.1, отличающийся тем, что указанным промотором является промотор РНК-полимеразы бактериофага Т7, участком терминации транскрипции является участок терминации транскрипции бактериофага Т7, сайт узнавания протеиназой представляет собой сайт узнавания энтерокиназой, фрагментом, кодирующим негеномную пару токсин-антитоксин, является система hok/sok, а геном, кодирующим маркер селекци, является ген устойчивости к канамицину.3. Вектор по п.1, содержащий последовательность, приведенную в Перечне последовательностей под номером SEQ ID NO:40.4. Бактерия, принадлежащая к роду Escherichia, - продуцент предшественника целевого рекомбинантного белка, содержащая вектор по п.1 с целевым геном, кодирующим указанный рекомбинантный белок, слитый с N-концевым пептидом, содержащим декагистидиновый кластер и сайт узнавания протеиназой.5. Бактерия по п.4, отличающаяся тем, что сайт узнавания протеиназой представляет собой сайт узнавания энтерокиназой.6. Способ получения рекомбинантного белка, включающий:- культивирование бактерии по п.4 в питательной среде, подх |
