一种双报告基因重组腺病毒载体及其构建方法与应用

摘要

一种重组腺病毒载体，含有人转铁蛋白受体基因和萤火虫荧光素酶基因，能在真核细胞中同时表达转铁蛋白受体蛋白和荧光素酶蛋白。其构建方法，其特征在于依次为以下步骤：(1)用PCR方法扩增人转铁蛋白受体基因；(2)将步骤(1)扩增的人转铁蛋白受体基因片段插入到含有萤火虫荧光素酶基因片段的穿梭载体上，获得重组穿梭载体，并进行测序分析；(3)将验证正确后的重组穿梭载体连接到骨架载体上，得到重组腺病毒质粒；(4)对所述重组腺病毒质粒进行XhoI酶切鉴定；(5)用人胚肾细胞系HEK293细胞包装所述重组腺病毒质粒，获得重组腺病毒载体。实验表明，所述重组腺病毒载体可在磁共振和光学双模态成像中作为肿瘤示踪剂应用。

主权项

一种重组腺病毒载体，其特征在于它含有人转铁蛋白受体基因和萤火虫荧光素酶基因，能在真核细胞中同时表达转铁蛋白受体蛋白和荧光素酶蛋白，所述人转铁蛋白受体基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所述。