一种弗吉尼亚栎组织培养方法

摘要

一种弗吉尼亚栎组织培养方法，属于植物组织培养方法。其特征在于，包括以下步骤：1）外植体的选取；2）外植体消毒；3）初代培养；4）不定芽增殖培养；5）壮苗培养；6）生根培养；7）炼苗和移栽。上述一种弗吉尼亚栎组织培养方法，能较好的保持母本的抗逆性和观赏性，有效提高弗吉尼亚栎繁殖系数。与种子繁殖相比，组织培养降低对进口种子的依赖性，能有效降低苗木成本，节省开支；与扦插繁殖相比，组织培养育苗周期短，4个月即可获得生根苗木，节约了成本。

主权项

一种弗吉尼亚栎组织培养方法，其特征在于包括以下步骤：1）外植体的选取：外植体取自大田植株或室内培养的幼苗；2）外植体消毒：取带芽茎段作为外植体，外植体经自来水冲洗10‑14小时后，再以70‑75%的酒精消毒25‑35秒，然后升汞浸泡3‑5分钟，然后以无菌水冲洗2‑3次，置于无菌玻璃瓶备用；3）初代培养：将消毒外植体剪成0.8‑1.2cm的带芽茎段接入培养基中培养25‑35天，给予光照2500‑3500 Lx，光周期14‑18hr/6‑10hr，温度25℃±2℃；所述的初代培养基由WPM培养基+6‑苄基腺嘌呤0.8‑1.2mg/L或1/4MS培养基+6‑苄基腺嘌呤0.8‑1.2mg/L组成；4）不定芽增殖培养：将初代培养基中有生长迹象的带芽茎段接入增殖培养基中进行增殖培养，培养条件同步骤3），培养周期为40‑50天；所述的增殖培养基由WPM +6‑苄基腺嘌呤0.1‑0.3mg/L+生长调节物质萘乙酸0.4‑0.6 mg/L或1/4MS+6‑苄基腺嘌呤0.1‑0.3mg/L+生长调节物质萘乙酸0.4‑0.6 mg/L组成；5）壮苗培养：将增殖培养基中叶色浓绿，长度1‑2cm的不定芽逐个切下，接入WPM或1/4MS培养基中培养25‑35天，培养条件同步骤3）；  6）生根培养：将壮苗培养后健壮的芽切去基部褐色物质和愈伤组织接入生根培养基中进行生根培养，先暗培养1.5‑2.5周，再光照培养3.5‑4.5周后生根，培养条件同步骤3）；所述的生根培养基由WPM +生长调节物质6‑苄基腺嘌呤0.8‑1.2 mg/L +生长调节物质萘乙酸0.4‑0.6 mg/L或1/4MS+生长调节物质6‑苄基腺嘌呤0.8‑1.2 mg/L +生长调节物质萘乙酸0.4‑0.6 mg/L组成；所述的初代培养基、不定芽增殖培养基、壮苗培养基、生根培养基中分别添加蔗糖15‑25g.L‑1，琼脂0.5‑1.0%，调节PH至5.5‑5.9；7）炼苗和移栽：将有生根的弗吉尼亚栎幼苗的培养基瓶盖打开，室温下炼苗2‑4天后，取出幼苗，洗去根部培养基，移栽装有河沙基质的苗床上，保持温度20‑25℃，湿度85%‑95%，适当遮荫即可。