一种培育抗黄萎病棉花新品种的分子育种方法

摘要

本发明属于分子育种领域，涉及一种培育抗黄萎病棉花新品种的分子育种方法。该方法是以保藏号为CGMCC NO.5574的海岛棉染色体片段导入系IL095为母本，保藏号为CGMCC NO.5575的海岛棉染色体片段导入系IL154为父本，杂交1代，再自交1代获得F2，每代都是单株收获；再以分子标记辅助选择获得抗多菌种的棉花新品系。利用这一方法，已经培育出抗多菌种的棉花新品系“南农海导5号”。通过分子标记辅助选择目标性状，可在2-3年内快速高效培育出抗多菌种的棉花新品系。“南农海导5号”抗棉花黄萎病的相对病指为15.51％-20.97％。

主权项

一种利用海岛棉染色体片段导入系培育抗黄萎病棉花新品种的分子育种方法，其特征在于包含如下步骤：（1） 以保藏号为CGMCC NO.5574的海岛棉染色体片段导入系IL095为母本，保藏号为CGMCC NO.5575的海岛棉染色体片段导入系IL154为父本，杂交1代，再自交1代获得F2，每代都是单株收获；（2）分子标记辅助第一次选择：F2种植，应用CTAB法提取DNA，采用所述的海岛棉染色体片段导入系IL095对应的分子标记引物对NAU2626、NAU5061、NAU5024、BNL1026和所述的海岛棉染色体片段导入系IL154对应的分子标记引物对BNL1034、NAU1366、BNL3171 进行PCR扩增，选择同时含有上述7个来源于海岛棉的分子标记条带，分子量分别是215bp；340bp；400bp；300bp；220bp；230bp；700bp的单株自交获得F3，种子按单株收获；其中分子标记引物对NAU2626正/反向序列为SEQ ID NO.3 / SEQ ID NO.4，NAU5061正/反向序列为SEQ ID NO.7 / SEQ ID NO.8，NAU5024正/反向序列为SEQ ID NO.5 / SEQ ID NO.6，BNL1026正/反向序列为SEQ ID NO.1 / SEQ ID NO.2，BNL1034正/反向序列为SEQ ID NO.9 / SEQ ID NO.10，NAU1366正/反向序列为SEQ ID NO.13 / SEQ ID NO.14，BNL3171正/反向序列为SEQ ID NO.11 / SEQ ID NO.12；（3）分子标记辅助第二次选择： 种植F3，每株提取DNA后，再利用所述的分子标记引物对NAU2626、NAU5061、NAU5024、BNL1026、BNL1034、NAU1366、BNL3171确定F3单株的基因型，同时具有7个来源于上述海岛棉的分子标记条带，分子量分别是215bp；340bp；400bp；300bp；220bp；230bp；700bp的单株即为抗多个黄萎病菌种的育成品系；（4）将步骤（3）筛选到的抗多个黄萎病菌种的F3种植在温室，利用致病力不同的黄萎病菌株进行抗病性筛选获得抗多个黄萎病菌种的育成品系。