一种促肝细胞生长活性肽的制备方法

摘要

一种促肝细胞生长活性肽的制备方法，它涉及促肝细胞生长活性肽的制备方法。本发明要解决现有促进肝细胞再生的物质制剂吸收效果差、稳定性差的问题，本发明的方法为：一、原料预处理；二、低温水抽提；三、热处理；四、离心收集上清液；五、采用超滤机超滤，收集小于5000道尔顿分子量的上清液；六、减压浓缩；七、超滤透析，收集大于1000道尔顿分子量的上清液；八、真空干燥制备促肝细胞生长活性肽粉。本发明促肝细胞生长小分子多肽类物质，其分子量主要分布为1000～3500，其吸收效果好，按其刺激指数应在4-6之间。具有很强的促进肝细胞再生功能，而且在70%乙醇中稳定，不被乙醇沉淀，具有较强的稳定性。

主权项

一种促肝细胞生长活性肽的制备方法，其特征在于促肝细胞生长活性肽的制备方法是按以下步骤进行的： 一、原料预处理：取新鲜的健康乳牛肝脏，剔去血管、筋膜，用纯化水冲洗掉表面血迹，沥去水分； 二、低温水抽提：在0℃～4℃下用胶体磨将步骤一中处理后的乳牛肝脏进行匀浆，并加入等体积的4℃纯化水，在温度为0℃～4℃的条件下，采用超声波破碎机以超声频率为25000Hz超声处理15min，然后在温度为0℃～4℃的条件下放置2h，得抽提物； 三、热处理：将步骤二得到的抽提物通过水浴以1～2℃/min的升温速度升温至80℃～82℃，并保温15min，然后冷却至20℃～30℃； 四、离心：将步骤三热处理后的抽提物在3500r/min的条件下离心15min，收集上清液； 五、超滤：用截留分子量为10000道尔顿的超滤器对步骤三收集的上清液进行超滤透析，收集小于10000道尔顿分子量的上清液，再用截留分子量为5000道尔顿的超滤器对收集小于10000道尔顿分子量的上清液进行超滤透析，收集小于5000道尔顿分子量的上清液，备用； 六、减压浓缩：将步骤五收集的小于5000道尔顿分子量的上清液，导入减压浓缩罐中，在温度为55℃～60℃、压力为150Pa的条件下进行减压浓缩至三分之一体积，得到浓缩液； 七、超滤透析：用截留分子量为1000道尔顿的超滤器对步骤六得到的浓缩液进行超滤透析，其中，透析液为纯水，透析液体积为浓缩液的两倍，收集大于1000道尔顿分子量的上清液，即得促肝细胞生长活性肽溶液； 八、促肝细胞生长活性肽粉制备：将步骤七得到的促肝细胞生长活性肽溶液加入到真空干燥机中，在温度为55℃～60℃、压力为150Pa的条件下，干燥2～4h，即得促肝细胞生长活性肽粉，即得促肝细胞生长活性肽。