一种促进柠檬明串珠菌发酵高产交替蔗糖酶的调控方法

摘要

一种促进柠檬明串珠菌发酵高产交替蔗糖酶的调控方法，属于食品生物技术领域。本发明提供一种诱导柠檬明串珠菌发酵分泌交替蔗糖酶的方法，以柠檬明串珠菌(Leuconostoccitreum)SK24.002为出发菌株，经斜面培养和种子培养后，接种在发酵培养基中，经采用温度、pH与碳源协同控制策略，实现提高交替蔗糖酶产量的目标，发酵液和菌体中的最终总酶活力达到510-960U/L。本发明的优点是能有效提高交替蔗糖酶产量及生产强度，并减少发酵液中杂蛋白的含量，提高了下游提取时的效率，生产费用降低，能耗减少，有利于工业化规模生产。

主权项

一种促进柠檬明串珠菌发酵生产交替蔗糖酶的调控方法，其特征在于步骤为：（1）菌体高密度生长阶段：以柠檬明串珠菌(Leuconostoc citreum) CCTCC NO：M 2011398为出发菌株，控制发酵液中葡萄糖浓度水平，初始葡萄糖浓度为10g/L，发酵4h后开始流加葡萄糖溶液使发酵液中葡萄糖浓度控制在15‑20g/L，发酵温度控制在22‑25℃，发酵pH控制在6.0，发酵17‑24h后停止流加葡萄糖溶液，补料生长阶段结束；（2）糖酶高效表达阶段：补料生长阶段结束之后调节发酵温度控制在28‑30℃，pH控制在5.4，每隔6‑10h补加质量浓度60%的蔗糖溶液，控制发酵液中的蔗糖浓度为5‑10g/L，两阶段共计48h后结束发酵；发酵培养基组成以g/L计：葡萄糖10，酵母粉5‑10，胰蛋白胨5‑10，K2HPO4 5‑10，MgSO4·7H2O 0.2‑0.5，MnSO4·H2O 0.01‑0.015，CaCl2 0.02‑0.025，吐温80 1‑5mL/L，pH 6.8‑7.0。